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支原体污染是细胞培养领域的一个普遍性问题,实验室细胞系支原体污染的平均比例为30-60%。支原体直径约为0.1-0.3μm,且具有变形能力,可透过常见的过滤头(0.22-0.45 μm),因此常规的过滤除菌的方法不能将其去除,细胞常用的抗生素(青霉素、链霉素)也对支原体无效。
支原体可通过细胞系之间交叉污染,操作人员的口腔、皮肤造成污染,或者血清等添加物而带入污染。支原体无法通过常规的光学显微镜观察到,不会引起培养基混浊,因此细胞被支原体污染一般难以察觉。
支原体会消耗必须氨基酸,影响细胞生长速率,促进代谢物积累,改变细胞形态,影响DNA、RNA以及蛋白质的合成,抑制细胞因子表达,改变被污染细胞的基因表达谱,诱导染色体畸变。我司的支原体高效清除剂能强烈的作用于感染的细胞支原体,以较低的作用浓度杀灭此污染物。不仅可用于细胞株,还可应用于敏感和易分化的细胞,如各类原代细胞、干细胞、上皮样细胞系。本产品经过了上百种细胞的测试和长期的实验验证,仅12小时就可以显著抑制支原体生长,1-2周左右即可清除支原体污染,且不影响细胞本身的代谢,完美兼具特异性和高效清除支原体的特点,且对细胞温和无损伤,最大程度上挽救您的珍贵细胞。
1、从-20℃冰箱内取出试剂,轻轻漩涡混匀并用75%的酒精喷洒试剂管的表面,在超净工作台上进行无菌操作;
2、对于已检测或怀疑有支原体污染的细胞分盘后,每10ml培养基中加入10µl Mycoplasma Elimination Reagent溶液培养7天,期间需换液时按同等比例加入。
3、连续加药培养1周后,检测是否还存在支原体污染。如果还存在支原体污染,可继续培养1-2周。
注意:
1)由于不同细胞对本品的敏感度不同(大多数情况下,细胞毒性很小),使用过程中如果该产品对细胞表现出毒性或者生长变慢,可以按1:2000稀释后使用。
2)为了发挥最好的药效,含药完全培养基建议现配现用,如果加药培养基未用完,于4℃冰箱中避光保存,2周内用完,使用培养基前需预热至37℃;
3)本产品经0.1μm过滤除菌,使用本产品时无需过滤,可直接加入培养基使用
4)支原体去除后,会有很好的预防和清除效果,但是如果环境或使用试剂中仍有污染源存在,细胞可能会再次污染,因此需做好适当的预防措施。
注意事项
1:使用本试剂前请仔细阅读说明书;
2:规范操作,包括反应体系的配制、样本处理及加样等;
3:为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作;
4:本产品仅供研究使用,不得用于诊断或治疗。