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快速封闭液是一种即用型,高效快速应用于 Western Blot 等实验的封闭液。封闭时间仅需 10 分钟,效果优于脱脂奶粉、BSA 、酪蛋白等传统封闭液,获得更高的信号,更低的背景值,信噪 比高。该试剂不含有哺乳动物来源的蛋白成分,避免与抗体发生交叉反应,适用于磷酸化的抗体,但不可用于生物素标记的抗体。
R即用型封闭液,无需配制
R封闭时间短,仅需 10 分钟
R背景低,信噪比高,优于常规奶粉等封闭的效果
R不含哺乳动物来源的蛋白,适用于磷酸化的抗体
1.完成转膜后,将膜移入到平皿或者其他适合的容器中(可以不洗涤膜)。
2.根据膜的大小,加入适量体积的封闭液,需完全浸没覆盖膜,对于 7.5x 8cm 的膜推荐使用量 5-10ml。
3.置于水平摇床上,室温条件下振荡孵育 10 分钟。
4.取出封闭完成的膜,用洗涤液冲洗蛋白膜 2-3 次,即可用于一抗孵育等后续 western blot 实验。
注意事项:
1. 通常用于 PVDF 膜或 NC 膜的封闭时间为 10 分钟。对于背景低的抗体,可以缩短到 5 分钟,而对于一些背景 非常高的抗体,可以尝试将封闭时间延长为 30-60 分钟。
2. 没有任何一种封闭液是适用于所有实验体系的,因此对于一些特殊的实验或抗体,可能需要具体情况考虑使用其它更合适的封闭液, 比如奶粉、BSA 等封闭试剂。
3. 信号弱或者无信号:有可能是上样量不足;转膜效率低;抗体效价低,特异性差等原因造成,需要根据实验情况进行调整
4. 背景高:有可能是抗体使用量过多;蛋白膜洗涤时间不足;抗体和封闭液发生交叉反应;试剂或仪器设备被污染等原因造成,需要根据实验具体情况进行调整
本产品仅用于科学研究。 |