产品介绍

介绍

Zell Shield®是一种即用型高浓度新型复合抗生素，无细胞毒性，通过阻止原核生物DNA及蛋白的合成，有效地祛除细胞培养中遇到的支原体、细菌、霉菌和酵母污染。Zell Shield®可常规添加到培养基中，保护细胞免受支原体的污染。

特点

1. 高效广谱
祛除支原体效果明显，同时，对细胞内外的革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌、病原虫、霉菌和酵母等污染亦可有效预防。

2. 无细胞毒性
Zell Shield®对大多数细胞株都不会产生细胞毒性。

3. 抗支原体活性稳定
在细胞培养期内，Zell Shield®始终保持稳定的活性。

4. 操作简便

即用型，直接加入到培养基中。

使用方法

该产品为无菌溶液，100倍浓缩。1瓶（50mL）Zell Shield^®足够供5L培养基使用（500ml培养基添加5ml Zell Shield^®，再混匀）。

Zell Shield^®可直接添加到任何动物细胞培养基中，37℃孵育7天后需更换，以达到最大的防护效果。

支原体污染祛除方法

据研究表明，约98％的支原体存在于细胞表面和细胞间隙。支原体直径约180~350nm，比细胞小很多，经低速离心与细胞分离。通过反复悬浮冲洗、离心，加上使用Zell Shield®，即可在细胞培养四代以内有效地祛除支原体。

1.首先把被支原体污染的细胞消化下来，放入离心管离心，弃上清。再加入干净的PBS悬浮冲洗细胞、低速离心（300~500r/min）、弃上清，反复三次。这样可祛除细胞表面60％~70％的支原体，支原体还剩约30％~40％。

2.细胞加入含1％Zell Shield®的新鲜培养基，传代培养。这时因培养基中Zell Shield®的抑制作用，细胞培养过程中，虽然细胞增殖，但残留的支原体无法增殖。细胞需再次传代时，把第二代细胞消化下来，离心，弃上清。加入新鲜PBS悬浮冲洗、再离心、弃上清，反复三次。这时，细胞上残留的支原体大约已剩余为最初污染量的10％左右。

3.细胞加入含1％Zell Shield®的新鲜培养基，传代培养。需再次传代时，把第三代细胞消化下来，离心，弃上清。加入新鲜PBS悬浮冲洗、再离心、弃上清，反复三次，可再次祛除60％~70％的残余支原体。通过冲洗、抑制、换液等操作，细胞中支原体的残留污染量大约只剩3％左右。

4.细胞加入含1％Zell Shield®的新鲜培养基，传代培养。需再次传代时把第四代细胞消化下来，离心，弃上清。加入新鲜PBS悬浮冲洗、再离心、弃上清，反复三次，可再次祛除60％~70％的支原体。此时，支原体残留量大约已低于1％。

支原体的增殖亦有密度要求，用Zell Shield®处理过四代的细胞，即便撤掉Zell Shield®，只要保证没有新的支原体人为再次带入，原有支原体也无法再增殖。随着传代，换液，支原体的老化、死亡，细胞中的支原体污染基本就彻底解决了。

要点归纳：

1.每次传代时，重复三次对细胞悬浮冲洗步骤非常重要，操作要正确、规范，以达最佳效果！

2.在培养基中加入1％Zell Shield®，抑制支原体增殖！

3.使用安全的血清、培养基等试剂，不再有新的支原体加入！

做到以上三点即可确保祛除支原体污染。